速率檢測法

❶ 速率法和重氮法的原理是什麼

1.速率法測定ALT原理

在酶反應確定的條件下，血清中ALT和底物作用，產生丙酮酸。底物中的乳酸脫氫酶(LDH)和還原輔酶I(NADH)使丙酮酸還原成乳酸，同時還原輔酶I被氧化成輔酶I（NAD）。腐於還原輔酶I在340nm（嚴格講是339nm）處有最大光吸收，因此伴隨還原輔酶I不斷被氧化的同時，A340。光吸收值隨芬下降，下降速率和ALT活力成比例，籍此測定ALT活力。

2.重氮法測定血清總膽紅素和直接膽紅素（結合膽紅素)

測定原理:血清中結合膽紅素可直接與重氮試劑反應產生偶氮膽紅素，所以稱為直膽，又稱1min膽紅素測定，非結合膽紅素測定時要以咖啡因、苯甲酸鈉為加速劑破壞膽紅素氫鍵再與重氮試劑反應，抗壞血酸破壞剩餘重氮試劑，加入鹼性酒石酸鈉使最大吸光度由530nm轉到598nm，非膽紅素的黃色色素及其它紅色與棕色色素產生的吸光度降至可忽略不計，使靈敏度和特異性升高，最後形成的綠色是由蘭色的鹼性偶氮膽紅素和咖啡因與對氨基苯磺酸之間形成的黃色色素混合而成。
試劑：（1）咖啡因 （2）鹼性酒石酸鈉液 （3）亞硝酸鈉液
（4）對氨基苯磺酸溶液 （5）重氮試劑（將3、4混合）
（6）5g/L NaN3 （7）膽紅素標准液
操作：
總膽管 結合管 對照管
血清（ml） 0.2 0.2 0.2
咖啡因-苯甲酸鈉試劑（ml） 1.6 1.6
對氨基苯磺酸溶液（ml） 0.4
重氮試劑（ml） 0.4 0.4
混勻後，總膽管置室溫10min，結膽管置37℃1min
NaN3（ml） 0.05
咖啡因-苯甲酸鈉試劑（ml） 1.55
鹼性酒石酸鈉溶液 1.2 1.2 1.2
以對照調零，測各管A600，查標准曲線
正常參考值：血總膽紅素 5.1~19umol/L(0.3~1.1mg/dl)
血清結合膽紅素 1.7~6.8umol/L(0.1~0.4mg/dl)

❷ 植物呼吸速率的測定方法及步驟

一．原 理 :在廣口瓶中，放入Ba(OH)2溶液，用其吸收植物材料呼吸過程中釋放的CO2。實驗結束後，用草酸溶液滴定剩餘鹼量，由空白和樣品二者消耗草酸溶液的之差可計算出呼吸過程中釋放的CO2量。

二．器材與試劑:

器材：廣口瓶測呼吸裝置，天平，酸鹼滴定台。

試劑：1/22N草酸溶液：准確稱重結晶草酸2.865g，溶於蒸餾水中，並定溶至1000ml。每ml溶液相當於1mg的CO2。飽和Ba(OH)2溶液(密封保存)。

指示劑：0.1%中性紅和0.1%次甲基藍水溶液等量混合，終點pH7.0。

三．課前准備：准備好萌發的小麥或水稻種子若干，實驗器材及試劑.

四．方法與步驟：

1． 稱取萌發的小麥或水稻種子20-30g，裝在小籃中，在廣口瓶內精確加飽和的Ba(OH)2溶液20ml，把小籃子掛在瓶塞上，放入廣口瓶內，並塞緊瓶塞。

2． 記錄測定開始時間，每過10分鍾左右，輕輕地搖動廣口瓶，破壞溶液表面的BaCO3薄膜，以利CO2的吸收。

3． 1小時後，小心打開瓶塞，迅速取出小籃，加12滴指示劑，立即重新蓋緊瓶塞，然後拔出小橡皮塞，把滴定管插入小孔中，用1/22N的草酸滴定，直至綠色轉變成紫色為止。記錄滴定鹼液所耗的草酸溶液的毫升數。

4． 另取一廣口瓶測呼吸裝置，在廣口瓶內也放20ml鹼液，不放測定材料，把此作為對照，其餘操作類同上述步驟。

按下式計算呼吸速率：

呼吸速率(mgCO2·g鮮重-1·h-1)= (對照滴定值正式滴定值)(ml)×草酸濃度(mN／ml)×CO2當量(mg／mN)/樣品重量(g鮮重)×測定時間(h)

❸ 代謝物酶法測定的速率法與終點法有何區別

速率法又稱連來續檢測法，是自指在多個時間點連續監測產物（或底物）在線性范圍內的生成量（或消耗量）即零級反應速率測定酶活性的方法。定時法是固定時間法的簡稱，是指測定反應開始後一段時間內（t1~t2）產物的生成量或底物的消耗量以測定的方法。兩種方法都是生物化學檢驗的方法，都需要比色。

❹ 光合作用的速率的測定方法

NaHCO3溶液里存在水解平衡，當CO2濃度降低時平衡向正反應移動，從而能補充CO2

❺ 求助反硝化速率測定方法

未免鏈接失效，還是把論文的題目直接發一下《分段進水A/O脫氮工藝反硝化速率的測定》（王卿卿，王社平，惠靈靈等） 查看原帖>>

❻ 請問測定硝化速率的標准方法是什麼有國標嗎

乙炔抑製法是測定反硝化速率最常用的方法。
硝化作用（nitrification）是指氨在微生物作用下氧化為硝酸的過程。硝化細菌將氨氧化為硝酸的過程。通常發生在通氣良好的土壤、廄肥、堆肥和活性污泥中。

❼ 簡述速率A法

速率法a通常用在酶活性測定時，反應曲線上肯定有成線性的區域，而兩點速版率法又稱固定時間法或一權級動力學法，利用的是一級反應，在儀器上的區別主要是前者會有一個檢測線性區線性度，利用最小二乘法擬合直線，計算速率；而兩點速率法沒有線性度檢測，直接用吸光度差除以時間計算

❽ 臨床檢驗中的速率法 終點法是什麼其中包括那些檢驗方法

速率法又稱連續檢測法，是指在多個時間點連續監測產物（或底物）在版線性范圍內的生成量權（或消耗量）即零級反應速率測定酶活性的方法。定時法是固定時間法的簡稱，是指測定反應開始後一段時間內（t1~t2）產物的生成量或底物的消耗量以測定的方法。兩種方法都是生物化學檢驗的方法，都需要比色。

❾ 底物法和速率法的區別

速率法a通常用在酶活性測定時，反應曲線上肯定有成線性的區域，而兩點速率法又稱固定時間法或一級動力學法，利用的是一級反應，在儀器上的區別主要是前者會有一個檢測線性區線性度，利用最小二乘法擬合直線，計算速率；而兩點速率法沒有線性度檢測，直接用吸光度差除以時間計算。

❿ 細菌生長速率 測定方法

測OD值變化。