速率检测法

❶ 速率法和重氮法的原理是什么

1.速率法测定ALT原理

在酶反应确定的条件下，血清中ALT和底物作用，产生丙酮酸。底物中的乳酸脱氢酶(LDH)和还原辅酶I(NADH)使丙酮酸还原成乳酸，同时还原辅酶I被氧化成辅酶I（NAD）。腐于还原辅酶I在340nm（严格讲是339nm）处有最大光吸收，因此伴随还原辅酶I不断被氧化的同时，A340。光吸收值随芬下降，下降速率和ALT活力成比例，籍此测定ALT活力。

2.重氮法测定血清总胆红素和直接胆红素（结合胆红素)

测定原理:血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应产生偶氮胆红素，所以称为直胆，又称1min胆红素测定，非结合胆红素测定时要以咖啡因、苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键再与重氮试剂反应，抗坏血酸破坏剩余重氮试剂，加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转到598nm，非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度降至可忽略不计，使灵敏度和特异性升高，最后形成的绿色是由兰色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。
试剂：（1）咖啡因 （2）碱性酒石酸钠液 （3）亚硝酸钠液
（4）对氨基苯磺酸溶液 （5）重氮试剂（将3、4混合）
（6）5g/L NaN3 （7）胆红素标准液
操作：
总胆管 结合管 对照管
血清（ml） 0.2 0.2 0.2
咖啡因-苯甲酸钠试剂（ml） 1.6 1.6
对氨基苯磺酸溶液（ml） 0.4
重氮试剂（ml） 0.4 0.4
混匀后，总胆管置室温10min，结胆管置37℃1min
NaN3（ml） 0.05
咖啡因-苯甲酸钠试剂（ml） 1.55
碱性酒石酸钠溶液 1.2 1.2 1.2
以对照调零，测各管A600，查标准曲线
正常参考值：血总胆红素 5.1~19umol/L(0.3~1.1mg/dl)
血清结合胆红素 1.7~6.8umol/L(0.1~0.4mg/dl)

❷ 植物呼吸速率的测定方法及步骤

一．原 理 :在广口瓶中，放入Ba(OH)2溶液，用其吸收植物材料呼吸过程中释放的CO2。实验结束后，用草酸溶液滴定剩余碱量，由空白和样品二者消耗草酸溶液的之差可计算出呼吸过程中释放的CO2量。

二．器材与试剂:

器材：广口瓶测呼吸装置，天平，酸碱滴定台。

试剂：1/22N草酸溶液：准确称重结晶草酸2.865g，溶于蒸馏水中，并定溶至1000ml。每ml溶液相当于1mg的CO2。饱和Ba(OH)2溶液(密封保存)。

指示剂：0.1%中性红和0.1%次甲基蓝水溶液等量混合，终点pH7.0。

三．课前准备：准备好萌发的小麦或水稻种子若干，实验器材及试剂.

四．方法与步骤：

1． 称取萌发的小麦或水稻种子20-30g，装在小篮中，在广口瓶内精确加饱和的Ba(OH)2溶液20ml，把小篮子挂在瓶塞上，放入广口瓶内，并塞紧瓶塞。

2． 记录测定开始时间，每过10分钟左右，轻轻地摇动广口瓶，破坏溶液表面的BaCO3薄膜，以利CO2的吸收。

3． 1小时后，小心打开瓶塞，迅速取出小篮，加12滴指示剂，立即重新盖紧瓶塞，然后拔出小橡皮塞，把滴定管插入小孔中，用1/22N的草酸滴定，直至绿色转变成紫色为止。记录滴定碱液所耗的草酸溶液的毫升数。

4． 另取一广口瓶测呼吸装置，在广口瓶内也放20ml碱液，不放测定材料，把此作为对照，其余操作类同上述步骤。

按下式计算呼吸速率：

呼吸速率(mgCO2·g鲜重-1·h-1)= (对照滴定值正式滴定值)(ml)×草酸浓度(mN／ml)×CO2当量(mg／mN)/样品重量(g鲜重)×测定时间(h)

❸ 代谢物酶法测定的速率法与终点法有何区别

速率法又称连来续检测法，是自指在多个时间点连续监测产物（或底物）在线性范围内的生成量（或消耗量）即零级反应速率测定酶活性的方法。定时法是固定时间法的简称，是指测定反应开始后一段时间内（t1~t2）产物的生成量或底物的消耗量以测定的方法。两种方法都是生物化学检验的方法，都需要比色。

❹ 光合作用的速率的测定方法

NaHCO3溶液里存在水解平衡，当CO2浓度降低时平衡向正反应移动，从而能补充CO2

❺ 求助反硝化速率测定方法

未免链接失效，还是把论文的题目直接发一下《分段进水A/O脱氮工艺反硝化速率的测定》（王卿卿，王社平，惠灵灵等） 查看原帖>>

❻ 请问测定硝化速率的标准方法是什么有国标吗

乙炔抑制法是测定反硝化速率最常用的方法。
硝化作用（nitrification）是指氨在微生物作用下氧化为硝酸的过程。硝化细菌将氨氧化为硝酸的过程。通常发生在通气良好的土壤、厩肥、堆肥和活性污泥中。

❼ 简述速率A法

速率法a通常用在酶活性测定时，反应曲线上肯定有成线性的区域，而两点速版率法又称固定时间法或一权级动力学法，利用的是一级反应，在仪器上的区别主要是前者会有一个检测线性区线性度，利用最小二乘法拟合直线，计算速率；而两点速率法没有线性度检测，直接用吸光度差除以时间计算

❽ 临床检验中的速率法 终点法是什么其中包括那些检验方法

速率法又称连续检测法，是指在多个时间点连续监测产物（或底物）在版线性范围内的生成量权（或消耗量）即零级反应速率测定酶活性的方法。定时法是固定时间法的简称，是指测定反应开始后一段时间内（t1~t2）产物的生成量或底物的消耗量以测定的方法。两种方法都是生物化学检验的方法，都需要比色。

❾ 底物法和速率法的区别

速率法a通常用在酶活性测定时，反应曲线上肯定有成线性的区域，而两点速率法又称固定时间法或一级动力学法，利用的是一级反应，在仪器上的区别主要是前者会有一个检测线性区线性度，利用最小二乘法拟合直线，计算速率；而两点速率法没有线性度检测，直接用吸光度差除以时间计算。

❿ 细菌生长速率 测定方法

测OD值变化。